基质辅助激光解析飞行时间质谱仪测试

产品介绍

仪器主要两部分：基质辅助激光解析电离离子源（MALDI）和飞行时间质量分析器（TOF）。MALDI的原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量传递给生物分子，而电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子，而使生物分子电离的过程。因此它是一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测即测定离子的质荷比（M/Z）与离子的飞行时间成正比 ，检测离子。

质谱（MS）通过分析分子离子的质量电荷比（m/z）来鉴定和定量检测分子。质谱仪内的质谱可以解释为测定一个样本内不同分子的特性。质谱仪可以直接分析任何易电离的生物分子。

基质辅助激光解吸/电离（MALDI）的优势在于其样本与化学基质混合产生离子，使得样本分析前处理工作大大减少。基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）结合了两个技术，包括基质辅助激光解吸/电离（MALDI）离子源和飞行时间质谱（TOF）。基于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）的概念，质谱完全改变了临床微生物室中的微生物的鉴定方法，因为它是一个快速、高通量、的以及的系统。

产品原理

将样品分散在基质分子中并形成晶体。当用激光照射晶体时，基质从激光中吸收能量，样品解吸附，基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离，电离的样品在电场作用下飞过真空的飞行管，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即通过离子的质量电荷之比（M/Z）与离子的飞行时间成正比来分析离子，并测得样品分子的分子量。例如，检测DNA样品时，DNA离子按其质量大小先后通过检测器，DN段越短，越早到达检测器。

样品种类一般为：蛋白质、核酸、多肽、大分子等。依据测试结果分为：低分辨和高分辨，低分辨精确到小数点后1位，高分辨精确到小数点后4位。

测试模式

有线性模式和反射模式，线性模式适合大分子（如蛋白质，核算，多聚物等），此模式分辨率和质量准确度低于反射模式，通常测得的为平均分子量。反射模式适合分子量＜5000Da的物质，如多肽，寡糖等，该模式分辨，可准确测得单同位素分子量。模式下面又分为：正离子和负离子模式，分子结构不同，有的更容易带正电，有的更容易带负电，正离子看的是带正电的离子，负离子看的是带负电的离子。常规是正离子模式。

常用的测试基质为：CHCA、 DHB、SA、TCNQ和DCTB。

溶剂：水、、二、氯、、四氢呋喃、、、甲苯等。

 测试要求

1，样品状态：可为粉末、液体样品，样品尽量不要含有盐。

2，粉末样品：细细的粉末5-10mg，在合适的溶剂中溶解性可以或者分散，常用溶剂为CDCl3甲苯、、、乙腈、三、水、、、THF。

3，液体样品：2mL，需要备注液体样品的具体浓度（一般要求不低于1mg/mL），以及缓冲液的成分（一般建议Tris，碳酸氢铵，浓度在20mM以下属于盐类，易电离，多的话干扰结果）

4，一般分子量越小测试的越准确，分子量**一万，误差比较大，仪器理论可以测到200000；

5，样品尽量不要含有盐，确认样品不含盐，含盐样品可能不出峰。

6，如果是液体样品，需要备注液体样品的具体浓度（一般要求不低于1mg/mL），以及缓冲液的成分（一般建议Tris，碳酸氢铵，浓度在20mM以下）；

7，如果对测试的模式（反射模式，线性模式），默认为线性模式，特殊请备注；

8，如果对基质有要求，请自行备注，常用的测试基质为：CHCA,DHB,SA

9，低分辨精确到小数点后1位，高分辨精确到小数点后4位

10，可测样品：蛋白质、核酸、多肽、大分子、**小分子等，可为粉末、液体样品，样品尽量不要含有盐；

常见问题

1. 测试时正负离子模式需要如何确认？

需要查文献确认一下，分子结构不同，有的更容易带正电，有的更容易带负电，正离子看的是带正电的离子，负离子看带负电的。如果确实不知道那个模式测试，建议先正离子模式测一下，但是要求两个模式都测试一下的，算两个样品收费。

2. 样品不纯可以测么？

需要确认下目标产物和杂质那个更易电离，如果产物易电离，杂质不电离，没影响的，反之就不行了。

3. 测试结果中为什么没有峰？

可能的原因：没有目标产物、样品浓度太低，样品不离子化，基质不合适

4. 选择基质的一般建议

先建议查下文献，确认下自己的条件，一般是蛋白类样品建议SA ，1万以下的建议DHB或者CHCA，常规DHB或者CHCA适用于80%的样品。常规：SA—常用于蛋白大分子，DHB— 常用于肽段及小分子，CHCA—常用于肽段及部分小分子。

5. Data Explorer V4.5分析软件下载、安装和打开数据